技术文章
TECHNICAL ARTICLES要完成一项漂亮的ELISA实验,不光要做足实验的准备,还要对其他各种辅助材料有所了解,这其中防腐剂的运用很重要,ELISA试剂盒中常用的防腐剂有:1.叠氮钠是HRP的抑制剂,凡是和HRP接触的试剂,一定不能用;2.硫柳汞在ELISA试剂中可普遍使用,但因其有毒,较少使用;3.市面许多试剂盒产品,用抗生素做防腐剂较多,如庆大。4.如果试剂仅在实验室短期使用,其实并不需加防腐剂,常规试剂放4度冰箱,抗体、酶等加甘油分装冻存即可。5.防污染可添加0.02%的叠氮钠,或0.01%的硫...
ELISA试剂盒收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。ELISA试剂盒样本的处理方式:1、组织提取液、肺泡灌洗液等,采集后离心分离,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存备用;2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用,胃液、唾液一般采集时间是空腹采集,一般隔夜尿不采集;3、采集血清时,一般要加入总体积1%的抗凝剂,采集后先室...
咱们在运用ELISA试剂盒96孔板的试验测定的时分,常发现有“边缘效应",也就是外周孔显色较基地孔深。经研究证真实温育中的热力学梯度也许是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在试验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃摆布)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与基地孔之间也许存在一热力学梯度。因而运用水浴或在将反响溶液参加至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地扫除“边缘效应",而且可进步测定的重复性。ELISA试剂盒还有就是在试验中...
今天我给大家讲讲ELISA试剂盒常压灭菌的操作关键:(1)进锅不挤压:摆放待灭菌的菌种袋必须分层,每层菌种袋不行摆太挤,要留一定空地,不能彼此挤压。不适宜将菌种袋卧叠,要分层立放,以确保蒸汽畅流和接种穴无缺。为了防止棉塞易潮湿,可在棉塞上盖一层薄膜或油纸,但掩盖物不行太大,否则会影响上基层蒸汽畅流;也可将4个菌种袋的棉塞并拢,棉塞向下一同塞到4个菌种袋的空地中,这样塑料袋标准要加长,但防潮作用杰出。(2)及时灭菌:随装随灭。配料到灭菌间隔时间越短越好,防止杂菌自繁。大规模出产...
ELISA试剂盒的应按规则力求准确在ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后??乖固宸从Φ耐瓿尚枰幸欢ǖ奈露群褪奔?,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在试剂盒中似不恰当。ELISA试剂盒属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有z贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的...
ELISA试剂盒即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。由于ELISA方法灵敏,特异性强不需要特殊设备,所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中除正常反应外,有时??杉揭恍┐砦蠼峁?即假阳性或假阴性);在此为大家解读下ELISA试剂盒检测受影响因素中标本的影响。溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性??赡苁侨苎逯泻泄趸肝镏?红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),在洗涤...
ELISA试剂盒途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物学活性抗原,通常不宜选用静脉打针。不一样个别对共同抗原的反应性不一样,而且不一样抗原发作免疫反应的能力也有强有弱,因此常常在打针抗原的一起,参与能增强抗原的抗原性物质,以影响机体发作较强的免疫反应,这种物质称为免疫佐剂。免疫前取等容积*或不*佐剂与免疫原溶液混合,用振荡器混匀成乳状,也可以在免疫前取需求量佐剂置乳钵中研磨,均匀后再边磨边滴参与等容积抗原液(其中加卡介苗3~4mg/ml或不加),加...
ELISA试剂盒因此含杂质较多的抗原也可选用捕获包被法,试验的特异性、敏感性均由此得以改善,重复性亦佳。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附联络的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的效果于??山郾揭蚁┌逑染贤庀哒丈?例如30W紫外灯,75cm照射12小时),以增加其吸附功能。例如,在检查抗DNA抗体时,需用DNA作为包被抗原,ELISA试剂盒而广泛的固相载体一般不能直接与核酸联络?;谎灾痪褪强乖蚩固辶绲焦滔嘣靥灞砻娴慕?。当抗原决定簇...